03. 세포의 구성물질 - 단백질

[단백질]

1. 아미노산 종류, 특성
ㄱ. 소수성
- C, H가 직선형
: 알라닌, 류신, 이소류신, 발린, 메티오닌 -> 알파나선 형성 o
: 글리신, 프롤린 -> 알파나선 형성 x
- 벤젠고리형
: 트립토판, 페닐알라닌 (티로신 - 극성)
ㄴ. 친수성
- -OH : 세린, 트레오닌, 티로신
- -NH2 : 아스파라긴, 글루타민
- -SH : 시스테인
ㄷ. 전하형
- 양전하형(염기성) : 리신, 아르기닌, 히스티딘
- 음전하형(산성) : 아스파르트산, 글루탐산

2. 구조 (1차 -> 3차)
- 1차
: 알파나선 - 4개 간격 C=O - - - H-N 사이 수소결합 형성 (159/2610/3711/48)
: 베타병풍 - 역평행 배열
- 3차
: 이황화 결합, 미오글로빈
: 샤페론 - PDI, 친수성 환경 제공
- 안핀셴 실험
: 요소가 이황화결합의 재형성 방해
- 4차
: 이온, 소수성, 수소결합 - 협동효과 o
: 이황화 - 협동효과 x

3. 단백질 분리정제학
ㄱ. 투석 : 친수성 용질 제거
ㄴ. 염석 : 소량염 - 용해도 증가 / 과량염 - 용해도 감소

ㄷ. 크로마토그래피
- 관 크로마토 그래피 : 목적 단백질을 마지막에 분리, 해상도는 관의 길이에 비례
Type 1. 등전점 비교
Type 2. 완충액 pH 바꾸기
Type 3. 등전점 알고있는 경우
- 겔여과 크로마토그래피 : 클수록 빨리 용출, 단위체 추정
- 친화성 크로마토그래피
* 100% 결합 시리즈 : 글루타티온, 히스티딘 태깅, 엘리사, 샌드위치 엘리사
- TLC : 색소분리, 전개율, 순상 - 소수성 전개액 / 역상 - 친수성 전개액

ㄹ. 전기영동
- B-ME : 이황화결합 파괴
- SDS : 나머지 결합 다 파괴, 아미노산 2개 당 1개씩 균일하게 들어감
- 폴리비즈아크릴아마이드 <- APS : 교차연결촉진 <- TEMED : 안정화
- Tris buffer - HCl - Gly : 압축 - 절편크기 영향 x, 분리 - 절편크기 영향 ㅇ
- 이차원 전기영동 : 등전점 전기영동 -> 전기영동